多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:
(1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。
(2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。
(3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
(4)取出后放在无尘的地方晾干。
(5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。
(6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。
(7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。
固定的原理:
细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
多聚赖氨酸的分子量:
多聚赖氨酸的分子量从15万-30万都有,我们常用的分子量是17万。多聚赖氨酸玻片如何处理?