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重金属研究NMT标准化方案丨中关村认证实验标准

 

 

为什么会被非损伤微测技术所吸引用于植物重金属研究?

 

 

 

 

JXB、PCE非损伤微测技术重金属胁迫研究案例

 

 

 

 

NMT与重金属胁迫如何结合?工程师带您一探究竟

 

 

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1)C2019-023,熊杰,浙江理工大学,Rice,水稻,根(距离根尖200μm,500μm),O2、Cd2+

Aeration Increases Cadmium (Cd) Retention by Enhancing Iron Plaque Formation and Regulating Pectin Synthesis in the Roots of Rice (Oryza sativa) Seedlings

 

2)C2019-024,柴团耀,中国科学院大学生命科学学院,BMC Plant Biol ,酵母菌、大肠杆菌,酵母细胞,大肠杆菌细胞,Cd2+

A repeat region from the Brassica juncea HMA4 gene BjHMA4R is specifically involved in Cd2+ binding in the cytosol under low heavy metal concentrations

 

3)C2019-032,张振华,湖南农业大学,plant sci,Cd2+、NO3-

Balance between nitrogen use efficiency and cadmium tolerance in Brassica napus and Arabidopsis thaliana

 

4)C2018-030,廉菲,江南大学,Sci Total Environ,水稻,根冠、伸长区、根毛区,Cd2+

The effect of biochar nanoparticles on rice plant growth and the uptake of heavy metals: Implications for agronomic benefits and potential risk

 

5)C2018-047,周功克,中科院青岛生物能源与过程研究所,Chemosphere,浮萍,根(根尖、距离根尖400μm,1000μm)
叶(顶点、节点、顶点与节点中间的位置),Cd2+

Comparative transcriptome analysis of duckweed (Landoltia punctata) in response to cadmium provides insights into molecular mechanisms underlying hyperaccumulation

 

6)C2018-052,李银心,中科院植物研究所,Plant Biotechnol J,甜高粱,根部(距离根尖300μm),Cd2+

Comparative transcriptome combined with morphophysiological analyses revealed key factors for differential cadmium accumulation in two contrasting sweet sorghum genotypes

 

7)C2018-059,李廷强,浙江大学,Plant Cell  Environ,东南景天,根部距离根尖2.5mm至3mm,Cd2+

Abscisic acid‐mediated modifications of radial apoplastic transport pathway play a key role in cadmium uptake in hyperaccumulator Sedum alfredii

 

8)C2019-001,潘科,深圳大学,Chemosphere,硅藻,藻细胞,Cd2+

Salinity-dependent nanostructures and composition of cell surface and its relation to Cd toxicity in an estuarine diatom

 

9)C2019-013,张伟、高建伟,山东大学、山东省农科院,Plant Physiology,拟南芥,根(距离根尖400μm),Cd2+

Mitochondrial Pyruvate Carriers Prevent Cadmium Toxicity by Sustaining the TCA Cycle and Glutathione Synthesis

 

10)C2019-034,王果,福建农林大学,Chemosphere,Cd2+

Chlorine weaken the immobilization of Cd in soil-rice systems by biochar

 

11)C2017-034,李芳柏,广东省科学院生态环境研究所,Environmental Pollution,悬浮细胞,Cd2+

Silica nanoparticles alleviate cadmium toxicity in rice cells: Mechanisms and size effects

 

12)C2015-003,王荔军,华中农业大学,New Phytologist,悬浮细胞,Cd2+

A hemicellulose-bound form of silicon inhibits cadmium ion uptake in rice (Oryza sativa) cells

 

13)C2015-001,罗志斌,西北农林科技大学,New Phytologist,根,Ca2+/Cd2+/H+

Overexpression of bacterial gamma-glutamylcysteine synthetase mediates changes in cadmium influx, allocation and detoxification in poplar

 

14)C2013-019,王荔军,华中农业大学,New Phytologist,悬浮细胞,Cd2+

Inhibition of cadmium ion uptake in rice (Oryza sativa) cells by a wall-bound form of silicon

 

15)C2013-015,罗志斌,西北农林科技大学,PLANT CELL ENVIRON ,根,Cd2+H+

Ectomycorrhizas with Paxillus involutus enhance cadmium uptake and tolerance in Populus × canescens

 

16)C2012-017,徐进,中科院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心,New Phytologist,根,Cd2+

Comparative physiological responses of Solanum nigrum and Solanum torvum to cadmium stress

 

17)C2012-016,徐进,中科院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心,New Phytologist,根,Cd2+

Comparative transcriptome analysis of cadmium responses in Solanum nigrum and Solanum torvum

 

18)C2012-009,赵福庚,南京大学,PLANT CELL ENVIRON ,根,K+/Ca2+

Cadmium impairs ion homeostasis by altering K+ and Ca2+ channel activities in rice root hair cells

 

 

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Cd2+、Pb2+、Cu2+、Ca2+、H+

 

 

 

 

 

 

1)Pb2+、Cu2+生理功能概述

 

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2)科研案例

以三种常见湿地植物为材料,芦苇在距根尖大约0-200μm处为Cu2+释放区域,而在0-500μm处表现出Pb2+和Cd2+净外排。尽管在芦苇根部的较老部分中有Cu2+,Pb2+和Cd2+的内流,但总流入量比香蒲或印度香豆小得多。穿过根细胞质膜的这种减少的金属离子吸收和/或增加的金属离子外流,可能在一定程度上解释了芦苇对金属的更高抗性。

 

Li, L., Yu, S., Peijnenburg, W.J.G.M. et al. Determining the fluxes of ions (Pb2+, Cu2+ and Cd2+) at the root surface of wetland plants using the scanning ion-selective electrode technique. Plant Soil 414, 1–12 (2017).

 

 

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1、动物样品

1)细胞

神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等

2)组织器官

肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑(海马体等)、胚胎(大鼠、鱼)、斑马鱼皮肤/鳃、耳蜗、心脏(香螺)、卵(鱼、鸡蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉组织(肌纤维、心肌)

3)其它动物样品

珊瑚、螨虫、昆虫(果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽)、蝌蚪、水蛭、蓝蟹(微感毛)、变形虫、水丝蚓

 

2、植物样品

1)营养器官

根:根、根毛、根瘤
茎:边材、心材、微管形成层、木质部
叶:表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

2)生殖器官

花:花瓣、花瓣表皮细胞、花粉
种子:整体、胚
果实:果壳、果皮、果肉(苹果、柑橘)、籽粒、棉花纤维、棉桃

3)细胞:植物悬浮细胞、液泡

4)愈伤组织

 

3、微生物样品

酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌(大肠杆菌)

 

4、其它生物样品

周丛生物

 

5、非生物样品

金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料

 

 

 

非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测,因此动植物材料在检测前,不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。

 

1、动物单细胞

因NMT是活体检测,故从培养箱中拿出来后,置于培养皿中,直接检测即可。

 

2、动物组织

因NMT是活体检测,无需提前处理。如检测部位天然暴露在外,如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞,直接检测即可。如检测部位位于体内,需在检测时暴露出检测部位(可采用麻醉的方式),后检测即可。

 

3、植物根茎叶等组织器官

天然暴露在外的组织器官,例如根、茎、叶的表面,无需任何处理,直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。

 

4、植物原生质体/液泡

因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测,检测时不接触样品,故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中,提取出来后检测。

 

 

5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

无需提前处理。因这些细胞处于组织内部,故检测时采用撕取等方式,暴露出相应细胞即可。

 

6、植物花粉管

离体萌发:在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测;在体萌发:将柱头置于培养皿中,待萌发一段时间后即可直接检测。

 

7、植物果实

无需提前处理。如待测部位位于果实内部,需在检测前暴露出相应部位即可。

 

8、植物悬浮细胞
无需提前处理。检测时,置于培养皿中检测即可。

 

 

 

 

 

即瞬时处理,是指在检测过程中,在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的处理方法,目的是为了观察瞬间干旱胁迫下,样品短时间内的离子/分子的变化趋势,即短时效应。

 

2、预处理/提前处理好后检测
是指在干旱胁迫一段较长的时间后(数十分钟/数小时/数天),观察植物离子/分子进出的情况,即长时效应。

 

 

 

检测时,只要求待测部位浸于溶液中(无需整体都浸在溶液里)。

 

 

 

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可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理,由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心,提供检测服务。

 

 

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关键词:标准化方案、重金属研究

 

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