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【成果回顾】农科院作物所景蕊莲:NMT发现泛素连接酶基因TaPUB15促水稻根盐害下排Na+保K+ 为探究其促耐盐机制提供证据

转自中关村旭月非损伤微测技术产业联盟

 

 

 

 

 

 

基本信息

主题:NMT发现泛素连接酶基因TaPUB15促水稻根盐害下排Na+K+ 为探究其促耐盐机制提供证据

期刊:Food and Energy Security

影响因子:5.242

研究使用平台:NMT植物耐盐创新平台

标题:TaPUB15, a U-Box E3 ubiquitin ligase gene from wheat,enhances salt tolerance in rice

者:中国农业科学院作物研究所景蕊莲、毛新国、李巧茹

 

检测离子/分子指标

Na+、K+

 

检测样品

2周龄水稻幼苗(转基因、WT)根分生区(距根尖100 μm根表上的点)

 

中文摘要(谷歌机翻)

     植物U-box(PUB)E3泛素连接酶在对环境胁迫和激素信号的响应中起着至关重要的作用,但在小麦(Triticum aestivum L.)中对其了解甚少。我们鉴定了一个U-box E3泛素连接酶基因TaPUB15,它在小麦栽培品种中是保守的。TaPUB15在多种组织中表达,且根部的表达量远高于其他组织。盐、脱落酸、4℃和聚乙二醇(PEG)诱导TaPUB15的转录。TaPUB15-D的过表达使转基因水稻的耐盐性得到改善,同时转基因水稻的根也增多。离子通量测定表明,转基因水稻植株的耐盐性得到改善,在盐度胁迫下保持较低的Na+/K+比值。基因表达测定表明,相对于野生型,转基因水稻中一些盐胁相关基因显著上调。转基因水稻的这些结果也在转基因拟南芥中得到了验证。我们的数据表明,TaPUB15在提高作物植物的耐盐性方面起着至关重要的作用,是未来促进耐盐小麦育种的宝贵基因资源

 

离子/分子流实验处理

100 mM NaCl处理1 h

 

离子/分子流实验结果

      为了更好地了解Na+和K+的动态变化,使用非损伤微测技术(NMT)来监测转基因和WT水稻根尖的Na+和K+流速。100 mM NaCl处理1 h后,所有测试的幼苗均显示出Na+外排。Na+在转基因水稻中的外排速率远高于WT(图1a)。同时,转基因水稻幼苗显示出K+内流,野生稻幼苗显示出K+外排(图1b)。因此,TaPUB15-D在水稻中的过表达明显增加了在盐胁迫下保K+和排Na+的能力。较低的Na+/K+比值确保转基因植株在高盐度条件下具有更好的耐盐性

 

图1. 转基因水稻在盐胁迫下Na+和K+的流速变化情况正值代表Na+、K+外排,负值代表Na+、K+吸收。

 

其他实验结果

  • 3个TaPUB15同源基因均高度保守

  • TaPUB15-D定位在细胞核和细胞质中

  • TaPUB15在幼苗根系表达量最高,其次是幼苗叶片、抽穗期根系和萌发期和幼苗期的根基部。在抽穗的节、茎和旗叶中表达量最低

  • 在250mM NaCl、50 μM ABA和4°C低温处理下,TaPUB15被强烈激活,但在16.1% PEG处理下TaPUB15被激活程度较低

  • TaPUB15-D过表达导致转基因水稻的根更长、更多

  • TaPUB15-D在水稻中的过表达增强了其耐盐性

  • 转基因株系中OsP5CS1的转录水平与WT相比增加了近4倍。钾转运基因OsHKT1;1的表达被盐胁迫显著诱导

  • TaPUB15-D的过表达减少了Na+的积累,使水稻转基因株系在盐碱条件下保持相对较低的Na+/K+比值

  • TaPUB15-D的过表达增强了转基因拟南芥的耐盐性

 

结论

      作为世界上广泛种植的谷类作物,小麦是人类的主食,在全球粮食安全中起着至关重要的作用,但高盐,干旱和其他非生物胁迫严重限制了小麦的高产和稳产。为了应对非生物胁迫,植物物种已经进化出多种响应机制。本研究发现了一个U-box E3泛素连接酶基因TaPUB15,它可以改变转基因水稻的根系结构,使其根系更深、更多,提高水稻和拟南芥的耐盐性。因此,TaPUB15是一种有价值的基因资源,可以用于提高小麦的耐盐性,也可能用于其他作物

 

测试液

0.1 mM NaCl, 0.1 mM KCl, pH 5.7

 

NMT实验标准化方案

·盐胁迫研究NMT标准化方案

 

NMT仪器信息

·活体培养环境监测仪

·智能自动化非损伤微测系统

 

 

 

原文链接:https://doi.org/10.1002/FES3.250

 

关键词:离子稳态,根系构型,盐胁迫, TaPUB15, U-Box E3